GS病理染色套液在常规制片中的作用
GS病理染色套液在常规制片中的作用
张海峰 袁燕玲 鲁海珍 谢永强
中国医学科学院肿瘤医院病理科
通过对细胞学免疫组化染色修复条件的实验染色结果对比,探索细胞学免疫组化不同修复方法的合理选择。方法 选用中国医学科学院L-02正常人肝细胞株培养的肝细胞群,应用Thinprep2000系统液基薄层细胞检测仪制片,根据修复条件的不同分为以下四组:实验组(透膜后高温高压修复),对照A组(透膜),对照B组(高温高压修复),对照C组(高温高压修复后透膜)。各组均采用第二代ElivisionTM super plus二步法进行免疫组化染色,根据免疫组化的染色结果进行评分,用spss13.0统计学软件根据数据性质统计分析。结果实验组检测结果均为阳性,阳性表达位于胞浆;实验组染色效果明显强于对照各组(实验组 7.70±1.69,对照A组3.35±1.57,对照B组3.00±1.38,对照C组6.75±1.83),差异有统计学意义(P<0.05)。结论 在然后再用高压锅热修复,再进行免疫组化染色,染色效果比较满意。
1. 材料与方法
1.1 材料
我院32例标本40个蜡快。切片机(Leica2235);烤箱;HE染色液;HE全自动染封一体机(LeicaST5020);中性封片胶;GS染色套液。
1.2 方法
将蜡快分别切两张切片置烤箱烤20分钟,然后将其中一套放在全自动染封一体机内染色,另一套用GS染色套液手工染色,***后用中性封片胶封片。详细步骤如下:全自动染封一体机中:二甲苯去蜡(两次)各5min,无水乙醇、95%乙醇、80%乙醇、70%乙醇各2min,水洗,蒸馏水洗3min,苏木素染10min,水洗,蒸馏水洗10s,1%盐酸酒精分化,水洗,蒸馏水洗,1%氨水返蓝1min, 水洗,蒸馏水洗10s,伊红5min,70%乙醇、80%乙醇、95%乙醇各10s,无水乙醇(两次)各1min,二甲苯(两次)各1min,封片。GS染色套液中:脱蜡液Ⅰ5min,脱蜡液Ⅱ2min,自来水缓流清洗2min,苏木素染色液1~3min,自来水缓流清10s,分化液2~3 s,自来水缓流清洗2min,伊红染色液1~3min,自来水缓流清洗3s,除浮染液3s,沥干,除水透明液1min,沥干,透明液2min,潮干封片。
2. 结果
GS切片染色技术与常规染色相比颜色略红,色彩鲜明,对比分明,背景干净,细胞结构清晰,但是细胞核的颜色稍浅,细胞边界欠分明。
3. 讨论
常规染色过程中主要污染源来自二甲苯,GS切片染色技术不仅杜绝了二甲苯对人体的伤害,而且常规染色时间37分钟,GS染色时间12分13秒,染色时间大大缩短,染色效果符合病理医生诊断要求。苯对于人的伤害已被国际社会认可,很多绿色环保试剂也在国外大量使用,但国内还很少用于临床。对于这种从根本上解决污染的染色方法,尚属于发展的初级阶段,我们习惯于常规的HE染色,新技术需要的适应过程,而彻底替代传统技术,就需要我们病理技术工作者的长期实践努力了。
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