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病理论坛在线咨询绿色环保无醛固定液与传统甲醛固定液的区别
绿色环保无醛固定液与传统甲醛固定液的区别
李冬梅 孙丽萍 王德田 罗玉凤
中国医学科学院 北京协和医院
摘自：2012年《诊断病理学杂志》
一、实验目的
通过GS无醛固定液与甲醛固定液的对比试验，验证GS环保试剂对组织形态、抗原性、RNA/DNA的保存能力。
二、实验材料
我院病理科病人活检及手术标本，乳腺癌、结肠癌、肺癌、卵巢癌、淋巴瘤五种组织，共12例样本。
三、实验方法
每例标本（未经固定的新鲜标本），各取12块大小基本相同的实质性肿瘤组织，分别装入10%中******尔马林和GS无醛固定液中固定，并分别固定后1天（指24小时）、3天、7天、15天、30天、60天进行脱水包埋（其中无醛固定液固定的用GS系列脱水剂脱水）。待全部标本制备完成后，统一切片并同时进行HE染色和免疫组化试验。
乳腺癌：ER、PR、C-erb-B2、Her-2基因荧光原位分子杂交
结肠癌：CA199、P53
肺癌：EGFR、Ki67
卵巢癌：CA125
淋巴瘤：LCA、CD20、CD45RO
关于Her-2基因荧光原位分子杂交检测说明：Her-2基因荧光原位分子杂交可以先做C-erb-B2染色，选择2例中1例C-erb-B2++至+++阳性的标本做FISH即可，具体做法可以首先选择固定1天及60天的两个时间点的两种固定方式同时做免疫组化实验，如60天时间点FISH检测阳性，则其他时间点可以不做。如60天时间点为FISH阴性，则应继续做固定30天时间点，依次类推直至做到FISH阳性的时间点。
四、试验结果
|
肿瘤类型 |
实验编号 |
Her-2 |
ER |
PR |
|
乳腺癌 |
RA1 RB1 |
0 0 |
+++ ++ |
+++ +++ |
|
RA2 RB2 |
0 0 |
+++ ++ |
+++ +++ |
|
|
RA3 RB3 |
0 0 |
+++ ++ |
0 0 |
|
|
RA4 RB4 |
切片未见CA组织，不做参考 |
|||
|
RA5 RB5 |
+++ +++ |
0 0 |
0 0 |
|
|
|
实验编号 |
Ca199 |
P53 |
|
|
结肠Ca |
JA1 JB1 |
+ + |
_ _ |
|
|
JA2 JB2 |
+ + |
+ + |
|
|
|
JA3 JB3 |
+ + |
+ + |
|
|
|
|
实验编号 |
EGFR |
Ki67 |
|
|
肺Ca |
FA1 FB1 |
+ + |
80% 50% |
|
|
FA2 FB2 |
+ + |
40% 20% |
|
|
|
|
实验编号 |
CA-125 |
|
|
|
卵巢Ca |
LA1 LB1 |
+ + |
|
|
|
|
实验编号 |
LCA |
CD20 |
CD45RO |
|
淋巴瘤 |
909184A1 909184A2 |
+ + |
+ + |
+ + |
A组:传统甲醛固定组织 B组:GS无醛固定组织
HE染色：GS无醛固定液HE染色核浆对比度鲜明，胞浆染色偏红，其他与传统甲醛固定无明显区别。免疫组织化学染色：ER、PR染色，GS无醛固定液RB组细胞核着色整体略淡，染色对比度差，其它各项染色强度高于传统试剂甲醛固定RA组。
五、讨论
传统甲醛固定液对组织渗透力强、固定均匀，组织收缩小，成本低。但它易挥发，具有较强烈的刺激性和高剧毒性。随着人们环保意识的提高，我们病理工作者都渴望建立有环保型的实验室，减少甲醛、二甲苯等有毒液体在我们日常工作中对身体的危害。寻求一种******无害的环保试剂来代替甲醛、二甲苯是国内外病理技术工作者的又一新的跨越性目标。我们希望看到新型环保试剂的产生，它能做到：⑴无色、无刺激性、低挥发、不含甲醛等任何醛类化合物，易生物降解。⑵能够保持良好的组织形态学结构。⑶有较强固定、脱水、脱脂兼硬化作用。⑷能*** 大限度地保护组织中抗原和核酸不被破坏、降解等特点。早日为我们病理技术工作者实现绿色、环保实验室的梦想！
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