登陆会员
注册会员
下载中心
病理论坛在线咨询异丙醇替代二甲苯在快速脱水程序中的应用
异丙醇替代二甲苯在快速脱水程序中的应用
薛晓伟 李星奇 王德田 钟定荣
中国医学科学院北京协和医院病理科
摘自：2014年02期《诊断病理学杂志》
病理标本送至病理科，经过常规脱水染色程序后，才能进行诊断，这个过程往往需要3 ~5天。随着小标本的数量增加，该脱水程序已不适合临床对病理报告发放时间的要求。本文探讨使用异丙醇替代二甲苯作为组织透明剂，应用于小标本的快速脱水。
1.材料与方法
1.1 材料
选取北京协和医院7月临床送检的结肠等20 余例手术大标本。全自动封闭式脱水机peloris II 2台，染色试剂为GS环保型染色套液，其它试剂为国产分析纯，石蜡 LEICA (58℃ ~60℃）。
1.2 方法
送检的大组织病理标本，经病理医师模拟结肠镜在每份标本的相同部位钳取2份，随机分为1h组和常规 组。1 h脱水程序:4%甲酸1 min， 85%乙醇1 min和6 min (55℃)，乙醇/异丙醇混合液(4:1) 1 min和6 min (55℃ )，异丙醇 1 min X2，异丙醇 12 min (55℃)，石蜡 20 min 和 5 min (85℃)，石蜡1 min (65℃)。常规脱水程序（略）。程序完成 后，分别进行石蜡包埋，3 ~4 μm切片，GS环保型试剂HE染 色，GC-)2封片胶封固。
2.结果
2.1 两组蜡块质量比较
经多次实验验证，经1 h脱水程 序的小组织透明效果较好，硬度适中，蜡块容易切出3 ~4 μm切片，切片完整无裂痕。与传统试剂长时间脱水程序无明显差别。
2.2 染色效果比较
经1h脱水程序制作的切片，HE染色后切片组织完整，厚薄均匀，核浆分明，符合优良片的标准 (图 1，2)。
图1为1h程序 图2为常规程序
3.讨论
病理科使用的透明剂二甲苯，因其价格低廉、透明效果好，常规应用于脱水和染色程序中。但是，二甲苯对************系统具有慢性毒性作用。近年来，多种二甲苯的替代剂相继出现，本实验中采用异丙醇作为快速脱水程序中的透明剂使用，采用GS环保型染色套液进行染色，取得了较好的效果。由于异丙醇处理组织过程中的重要作用是软化组织，且对组织收缩作用较大，为避免组织由无水乙醇入 异丙醇造成的组织骤缩，本次实验特别设计了省去无水乙醇，采用两步乙醇/异丙醇4: 1混合液的方法。结果证明，组织没有出现明显的骤缩。同时，在HE染色过程中使用GS 环保型试剂，取得良好的制片效果，说明GS环保型试剂可以应用于快速脱水处理的切片染色中。
总之，异丙醇作为透明剂应用于快速脱水程序中是可行的，GS环保型试剂适用于快速脱水的组织切片染色，染色质量优良。快速脱水程序不仅能够病理标本的个性化处理，减少患者病理报告等待时间，更重要的是对病理从业人员的二
甲苯接触危害大大降低了。但是，经过异丙醇透明的快速脱水后的标本，特殊染色和免疫组化的质量如何，是我们下一步实验所要探讨的重点。
参考文献
[1] 王德田，董建强，梁志勇.实用现代病理学技术[M].北京： 北京协和医科大学出版社，2012:61 -62.
[2] 龙建洲.异丙醇替代二甲苯在组织透明中的应用[J].检验 医学与临床，2010:2(7) :161 -162.
下载地址：