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异丙醇替代二甲苯在快速脱水程序中的应用

异丙醇替代二甲苯在快速脱水程序中的应用

薛晓伟  李星奇  王德田  钟定荣

中国医学科学院北京协和医院病理科

摘自:201402期《诊断病理学杂志》

病理标本送至病理科,经过常规脱水染色程序后,才能进行诊断,这个过程往往需要3 ~5天。随着小标本的数量增加,该脱水程序已不适合临床对病理报告发放时间的要求。本文探讨使用异丙醇替代二甲苯作为组织透明剂,应用于小标本的快速脱水。

1.材料与方法

 1.1 材料

选取北京协和医院7月临床送检的结肠等20 余例手术大标本。全自动封闭式脱水机peloris II 2台,染色试剂为GS环保型染色套液,其它试剂为国产分析纯,石蜡 LEICA (58 ~60℃)

 1.2 方法

送检的大组织病理标本,经病理医师模拟结肠镜在每份标本的相同部位钳取2份,随机分为1h组和常规 组。1 h脱水程序:4%甲酸1 min 85%乙醇1 min6 min (55),乙醇/异丙醇混合液(4:1) 1 min6 min (55 ),异丙醇 1 min X2,异丙醇 12 min (55),石蜡 20 min 5 min (85),石蜡1 min (65)。常规脱水程序略)。程序完成 后,分别进行石蜡包埋,3 ~4 μm切片GS环保型试剂HE染 色,GC-)2封片胶封固。

2.结果

 2.1 两组蜡块质量比较

经多次实验验证,经1 h脱水程 序的小组织透明效果较好,硬度适中,蜡块容易切出3 ~4 μm切片,切片完整无裂痕。与传统试剂长时间脱水程序无明显差别。

 2.2 染色效果比较

1h脱水程序制作的切片HE染色后切片组织完整,厚薄均匀,核浆分明,符合优良片的标准 ( 12)


   图11h程序                                                    2为常规程序

3.讨论

病理科使用的透明剂二甲苯,因其价格低廉、透明效果好常规应用于脱水和染色程序中。但是,二甲苯对************系统具有慢性毒性作用。近年来,多种二甲苯的替代剂相继出现本实验中采用异丙醇作为快速脱水程序中的透明剂使用,采用GS环保型染色套液进行染色,取得了较好的效果。由于异丙醇处理组织过程中的重要作用是软化组织且对组织收缩作用较大,为避免组织由无水乙醇入 异丙醇造成的组织骤缩,本次实验特别设计了省去无水乙醇采用两步乙醇/异丙醇4: 1混合液的方法。结果证明,组织没有出现明显的骤缩。同时,在HE染色过程中使用GS 环保型试剂取得良好的制片效果说明GS环保型试剂可以应用于快速脱水处理的切片染色中。

总之,异丙醇作为透明剂应用于快速脱水程序中是可行的,GS环保型试剂适用于快速脱水的组织切片染色,染色质量优良。快速脱水程序不仅能够病理标本的个性化处理,减少患者病理报告等待时间,更重要的是对病理从业人员的二 甲苯接触危害大大降低了。但是,经过异丙醇透明的快速脱水后的标本,特殊染色和免疫组化的质量如何,是我们下一步实验所要探讨的重点。

 

参考文献

[1] 王德田董建强梁志勇.实用现代病理学技术[M].北京: 北京协和医科大学出版社,2012:61 -62.

[2] 龙建洲.异丙醇替代二甲苯在组织透明中的应用[J].检验 医学与临床,2010:2(7) :161 -162.




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添加时间:2016-04-13 点击量:1433

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