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病理论坛在线咨询环保试剂及超声组织处理仪在乳腺癌粗针穿刺中的应用
环保试剂及超声组织处理仪在乳腺癌粗针穿刺中的应用
赵洁 付海洋 王成勤
青岛大学医学院附属医院 病理学教研室
摘自：2013年01期《诊断病理学杂志》
常规乙醇一二甲苯制片法加上免疫组化染色往往需要1周时间，本文采用GS组织处理套液，利用超声组织处理仪处理粗针穿刺乳腺标本，不仅大大缩短了诊断时间，且不影 响免疫组化染色效果，其方法如下。
1.材料与方法
1.1材料
青岛大学医学院附属医院2011-10—2012-4间送检的乳腺粗针穿刺标本167例。GS组织样本制备套液及 GS病理切片染色套液由哈尔滨格林标本技术开发有限公司提供；钧镒JYCL-2型超声处理仪由山东鼎成医疗设备科技有限公司提供；Boond-nax型全自动免疫组化染色机由德国 徕卡公司提供。免疫组化—抗为北京中杉金桥生物有限公司提供，检测系统为德国徕卡公司提供的Boond-nax专利的Compact polymer(紧凑型聚合物）检测技术。
1.2方法
用超声组织处理仪先将乳腺穿刺标本经4%中性缓冲甲醛前固定15 min，再用GS固定液45℃：固定10 min，GS环保型脱水试剂I、II及透明试剂50 ℃各处理15 min；62 ℃：浸蜡20 min；常规石蜡包埋、切片。GS组织样本染色套液行HE、免疫组化染色均设外部阳性对照。
2. 结果
用GS组织样本制备套液制作的蜡块，切片软硬适宜，厚薄均匀，尤其是带脂肪的组织，切片完整。HE染色镜下观察组织结构清晰，红蓝对比分明；免疫组化染色无背景着色，结果与传统方法无明显差异（图1 ~3)。
图1 乳腺癌，HE染色
图2乳腺癌，ER(+) EnVision法
图3乳腺癌，c-；rBb~2 ( + ) EnVision法
3.讨论
传统制作标本的方法具有高毒性，易挥发等缺点，而环保型的GS组织样本制备套液及GS病理切片染色套液，均为非苯类******型复合试剂，可替代二甲苯对组织的脱水及透明。
乳腺穿刺标本用GS环保型无醛固定液直接固定标本，HE染色时无明显差异，但免疫组化染色时背景着色较重，这可能与GS环保型无醛固定液是以醇类为主体的复合固定液 有关；根据ASCO/CAP乳腺癌指南中规定乳腺标本必须经 4%中性缓冲甲醛固定的原则3 ，在使用环保试剂之前本文采用4%中性缓冲甲醛在常温下应用超声波对穿刺标本进行了前固定，取得满意效果，在HER2检测上尤为明显，167例标本中HER2 (卅）为31例，其中7例经CISH、FISH检测为HER2扩增，符合率均达100%。
环保型超声处理仪有4个操作缸，缸内容量500ml， 可同时处理40余个标本，带有定时启动停止功能，温度可调。处理乳腺穿刺标本时应注意:①由于超声波的作用可产生一定的温度，一定要确保实验室通风，将设备放置在通风柜内；②脱水时因需加温处理，试剂会蒸发，所以要及时观察补充脱水缸中的试剂，总体要求500个标本彻底更换一次液体。
总之，应用GS环保型试剂可减少试剂对实验室的污染， 而应用环保型超声标本处理仪处理标本2天即可得到免疫组化结果。此方法在无冷冻切片机的基层单位也可应用于临床快速病理诊断。
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