GS固定染色套液与传统固定染色套液在冷冻切片制备中的比较

GS固定染色套液与传统固定染色套液

在冷冻切片制备中的比较

沈贵华  王知博  王冰凝  郑波  谢阿欢

中国医学科学院肿瘤医院病理科

摘自：2012年第05期《诊断病理学杂志》

传统固定染色套液虽然制片技术性质稳定，但是，所采用的试剂不够环保。GS环保试剂套液弥补了此缺陷。冷冻报告的准确率取决于冷冻切片制备的成败，而固定和染色是制备中的两个***关键步骤。本文通过GS套液与传统HE套液在冷冻切片制备过程中的效果比较，探讨GS固定染色套液在冷冻切片制备过程中的应用。

1.材料与方法

 1.1 材料

标本随机取自中国医学科学肿瘤医院手术标本，包括甲状腺、淋巴结、肺、肾、脑、卵巢、消化管等128例。GS固定染色套液（哈尔滨格林标本技术开发有限公司研制并生产），传统固定液（我院现用95%乙醇），HE染色套液，中性树胶。

 1.2 方法

①取材与切片：取材后OCT包埋，行常规冷冻切片，厚度8 pm。②固定与染色：切片后室温略干燥，分别放进两种固定液中（GS无醛固定液和传统95%乙醇），室温固定1 min，分别行：

传统HE套液染色:水洗—苏木精1 min—水洗—1%盐酸乙醇略分化—水洗—氨水返蓝—水洗—伊红10 s—稍水洗—梯度乙醇脱水—二甲苯透明—中性树胶封固。

GS无汞套液染色:水洗—苏木精1 min—水洗—分化液2 s—水洗—蓝化液5 s—水洗—伊红10 s—稍水洗—除浮染液2 s—95%乙醇—无水乙醇—透明液2 s—树胶封固。

2.结果

 2.1 两种固定液传统染液染色结果

镜下示，GS无醛固定液固定的切片细胞核无收缩，细胞形态较清晰，色彩鲜艳，核浆对比良好（图1) ；95%乙醇固定的切片，细胞收缩明显，组织结构清晰，细胞染色尚可（图2)。

 2.2 两种套液分别染色结果

镜下示，经GS套液固定染色的组织，清晰度明显改善，其他差异不大。

 2.3 两种固定液应用GS无汞染色套液结果

镜下示，95%乙醇经缩短固定时间后，经GS染色套液染色，细胞收缩明乙醇固定液，淋巴结转移性乳头状癌显改观，背景清晰，无核偏位现象，除细胞质染色稍淡外，与GS套液染色无明显差异。

                             图1 GS固定液，淋巴结转移性乳头状癌

                                图2 95%乙醇固定液，淋巴结转移性乳头状癌

3.讨论

冷冻切片是病理医师做出明确诊断的***根本依据，而制备一张高质量冷冻切片的关键步骤就是固定与染色，因此，固定液与染液的选择和应用极其重要。目前，冷冻切片中固定液种类繁多，如甲醇、中性甲醛、AFF液、丙酮、乙醚乙醇混 合液等。但均不符合环保要求，而其中部分固定液（如4% 中性甲醛、AFF液等），短时间固定效果不佳，清晰度差，核浆着色淡，对比差，细胞肿胀、变形，形成空泡，易造成漏诊、误诊，延误******，故没有列入这次对比实验。

95%乙醇长时间固定可使组织细胞收缩明显，不能保存组织细胞的***初完整形态，而缩短固定时间后，利用GS染色套液染色，则能克服这一弱点，制片效果明显改善，各项指标均能达到良好标准。

传统HE套液虽然性质稳定，但是，所应用的试剂二甲苯可对人体神经系统、造血系统造成不同程度的损伤，危害健康，苏木精中含有汞成分，不符合环保排放的需求。而GS 套液作为一种环保型试剂，******、无色、无异味、无刺激性、pH值适中、不含汞成分，制片效果与传统套液效果相当，值得推广。

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添加时间：2016-04-12 点击量：1398