绿色环保无醛固定液与传统甲醛固定液的区别

绿色环保无醛固定液与传统甲醛固定液的区别

 

中国医学科学院 北京协和医院  李冬梅  孙丽萍**  王德田  罗玉凤*

    关键词  绿色  环保固定   甲醛固定  区别

实验目的：通过GS无醛固定液与甲醛固定液的对比试验，验证GS环保试剂对组织形态、抗原性、RNA/DNA的保存能力。

实验材料：我院病理科病人活检及手术标本，乳腺癌、结肠癌、肺癌、卵巢癌、淋巴瘤五种组织，共12例样本。

实验方法：每例标本（未经固定的新鲜标本），各取12块大小基本相同的实质性肿瘤组织，分别装入10%中福尔马林和GS无醛固定液中固定，并分别固定后1天（指24小时）、3天、7天、15天、30天、60天进行脱水包埋（其中无醛固定液固定的用GS系列脱水剂脱水）。待全部标本制备完成后，统一切片并同时进行HE染色和免疫组化试验。

    乳腺癌：ER、PR、C-erb-B2、Her-2基因荧光原位分子杂交

    结肠癌：CA199、P53

    肺癌：EGFR、Ki67

    卵巢癌：CA125

    淋巴瘤：LCA、CD20、CD45RO

    关于Her-2基因荧光原位分子杂交检测说明：Her-2基因荧光原位分子杂交可以先做C-erb-B2染色，选择2例中1例C-erb-B2++至+++阳性的标本做FISH即可，具体做法可以首先选择固定1天及60天的两个时间点的两种固定方式同时做免疫组化实验，如60天时间点FISH检测阳性，则其他时间点可以不做。如60天时间点为FISH阴性，则应继续做固定30天时间点，依次类推直至做到FISH阳性的时间点。

肿瘤类型	实验编号	Her-2	ER	PR
乳腺癌	RA1 RB1	0 0	+++ ++	+++ +++
	RA2 RB2	0 0	+++ ++	+++ +++
	RA3 RB3	0 0	+++ ++	0 0
	RA4 RB4	切片未见CA组织，不做参考

                A组:传统甲醛固定组织                                               B组:GS无醛固定组织

固定时肉眼观察:RA组液面浑浊，组织上浮。RB组液面清亮，组织变白变硬，有沉底现象。

    HE染色：GS无醛固定液HE染色核浆对比度鲜明，胞浆染色偏红，其他与传统甲醛固定无明显区别。免疫组织化学染色：ER、PR染色，GS无醛固定液RB组细胞核着色整体略淡，染色对比度差，其它各项染色强度高于传统试剂甲醛固定RA组。

讨论：传统甲醛固定液对组织渗透力强、固定均匀，组织收缩小，成本低。但它易挥发，具有较强烈的刺激性和高剧毒性。随着人们环保意识的提高，我们病理工作者都渴望建立有环保型的实验室，减少甲醛、二甲苯等有毒液体在我们日常工作中对身体的危害。寻求一种******无害的环保试剂来代替甲醛、二甲苯是国内外病理技术工作者的又一新的跨越性目标。我们希望看到新型环保试剂的产生，它能做到⑴无色、无刺激性、低挥发、不含甲醛等任何醛类化合物，易生物降解。⑵能够保持良好的组织形态学结构。⑶有较强固定、脱水、脱脂兼硬化作用。⑷能保护组织中抗原和核酸不被破坏、降解等特点。早日为我们病理技术工作者实现绿色、环保实验室的梦想！

    作者  邮编100730       江西省妇幼保健院

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添加时间：2016-04-12 点击量：1385