GS环保试剂制作病理大切片的应用
GS环保试剂制作病理大切片的应用
刘洋 薛晓伟 王德田
首都医科大学附属朝阳医院病理科 中国医学科学院北京协和医院病理科
摘自:2013年12期《诊断病理学杂志》
传统的固定、脱水及染色试剂中含有甲醛、二甲苯和氧化汞有害物质,虽然在制作病理切片时间悠久,方法也很成熟,但不利于环保和工作人员的身体健康。我院于2012年应用GS环保试剂套液制作全喉大标本15例,每例横切面、纵切面各5个组织切面,分别进行组织脱水处理,脱水效果与传统方法基本一致,在制作组织切片上优于传统方法,是一种完全可以替代传统试剂的环保型试剂。
1. 材料与方法
1.1 材料
收集首都医科大学病理教研室 一15例,共计120余例组织块,分成2组,分别用传统试剂和GS环保试剂进行组织制备和染色,GS环保试剂组织制备和染色试剂均由哈尔滨格林标本技术开发有限公司研制生产。脱水机采用VIP-6型樱花脱水机,切片机采用VIS-410型樱花推拉式切片机。
1.2 方法
传统试剂组织制备(按常规方法)。GS环保试剂组织制备固定液I6h;固定液II4h;80%乙醇1h;905乙醇1h;脱水液I3h×2;透明液2h×2;浸蜡液2h×4。传统HE染色过程需要40min完成。
GS染液染色程序 脱蜡液I、II各4min;无水乙醇10s;95%乙醇10s;流水洗,苏木精染液3~5min;流水洗2min;分化液3s;流水洗1min;蓝化液5s;流水洗2min;伊红染色液30s~2min;流水洗10s;梯度乙醇脱水,透明,封固。染色过程需要20min完成。
2. 结果
2.1 蜡块质量
采用GS环保试剂制造的组织蜡块,蜡块平整无裂,硬度适中,易于切出3~4μm切片,且切片完整,无断裂,切滑无皱缩脱浇,与传统试剂脱水制备的蜡块没有较大差别。
2.2 制片质量
GS环保试剂进行HE染色完成的切片光学显微镜下观察苏木精、伊红着色均匀;无细胞核皱缩和肿胀变形;可以清楚分辩组织层次(图1~2),符合优良制片标准。
3. 讨论
由于常规石蜡切片较小,给镜下观察组织结构造成一定的局限性,为了病理诊断和科研工作的需要,有时为了观察整个大块组织的细微结构,必须制作完整的大组织切片,以便能在同一张切片中详细地观察到病变及其毗连组织的情况。制作高质量大组织切片的前提是组织处理要适中,这就对固定脱水过程中液体的质量提出了更高的要求。
GS环保型试剂在病理制片中的应用已经有较多的报道,但在大组织切片制作方面鲜有报道。我们采用GS环保型试剂进行大组织切片的组织制造和HE染色,获得了高质量的组织蜡块和切片,证明GS环保试剂脱水和染色可靠,更重要的是环保型试剂能将病理科工作人员从甲醛、二甲苯等有毒气体的工作环境中解脱出来,有利于工作人员的身心健康。
参考文献
[1] 王德田,董建强,梁志勇,实用现代病理学技术[M].北京:中国协和医科大学出版社,2012:61-62.
[2] 贺占国,张文,陈静,等。大组织切片的制作探讨[J].诊断病理学杂志,2005,1(12):74.
[3] 田玉旺,朱红艳,李琳,GS环保试剂在病理制片技术中的应用[J].诊断病理学杂志,2011,4(19):312-313.下载地址: