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病理论坛在线咨询GS环保套液在病理技术工作中的应用
GS环保套液在病理技术工作中的应用
寇雪梅 赵玉莹
武警北京总队第二医院病理科 黑龙江省口腔病防治院
摘自：2012年09期《黑龙江医学》
在病理技术工作中，甲醛和二甲苯做为常规试剂被大量应用，但这些试剂是具有强烈刺激性的挥发性液体，不仅污染环境，还严重危害人体健康。 因此，迫切需要寻找一种******、无害，且安全可靠的甲醛和二甲苯替代品。我们将GS环保套液应用于病理技术工作中，获得满意结果。现介绍如下：
1. 材料和方法
1.1 标本
选取我院临床送检的各种活体组织病理标本，如：胃、肠、肝、脾、乳腺、子宫、淋巴结、脂肪等，常规取材，切成1. 5 cm X 1. 0 cm X 0. 2 cm大小的组织块，包括穿刺活检和腔镜活检的小标本，装人包埋盒中，放人GS无醛固定液中固定12 h。
1.2 主要仪器和试剂
脱水机Leica ASP 200型，切片机Leica 2245 型，免疫组化试剂（中杉公司），GS组织样本制备及染色套液（哈尔滨格林公司）。
1.3 方法
1.3. 1 GS环保套液制片方法
标本放人Leica全自动脱水机处理，具体各个工作缸装液体和运行时间如下：（1) GS无醛固定液1 h；(2) GS无醛固定液 3 h；(3) GS 脱水剂I，30 min；(4) GS 脱水剂 I， 1 h；(5) GS 脱水剂 Ⅱ，30 min；(6) GS 脱水剂 Ⅱ，1 h；(7)GS 透明剂 1 h；(8)GS 透明剂 2 h；(9)GS 石蜡 I，2h；(10)GS 石蜡 I，2h；(11)GS 石蜡 Ⅱ，1 h（注:脱水机内装的GS套液为2套，更换试剂时，只需将前一个缸的试剂倒掉，把后一个缸前移即可）。
1.3.2 GS环保套液HE染色步骤
染色时间为15 ~30 min，具体：（1)GS脱蜡液I，5 min，脱蜡液 Ⅱ，5 min；自来水洗，2 min；(2)苏木素染色 3 ~5 min， 自来水洗，10 s；(3)常规分化、蓝化、伊红染色后， 自来水洗3 s；(4)除浮染液3 s，沥干残留试剂；（5) 除水透明液1 min，沥干；（6)透明液3 min，无苯封片剂封片。
1.3.3免疫组化染色
采用一步法进行，具体步骤同常规。
2. 结果
使用GS套液制备的组织蜡块，在切片中感觉组织软硬适中，尤其是处理皮肤、肌瘤等组织，没有过硬现象，切片厚薄均匀，连续性好，常规HE染色速度快，组织结构清晰，细胞形态完整，核桨比清晰，与传统组织切片染色结果相比无明显差异（见图 l ~5)。
图4 HE4 > (乳腺，GS套液制作)
图5
HE4>(脂肪，GS套液制作)
采用GS套液制备的组织石蜡切片，经免疫组化染色显示细胞内抗原性保存好，阳性结果定位准
确，背景清晰（见图6、7)，与传统组织染色效果无明显差异。
3. 讨论
3.l 甲醛固定液的优缺点
组织处理过程中，组织固定直接影响病理切片的质量和免疫组化标记的结果。因此，选择一种安全有效的组织固定液，对病理诊断至关重要。传统的甲醛固定液由于其渗透能力强，固定均匀，组织收缩小，一直作为病理科常规固定液。但其缺点如下:①有刺激性气味，易挥发，接触皮肤可致过敏；②存放过久可产生三聚甲醛，影响固定效果； ③易形成甲醛色素，与含铁血黄素相混淆；④不能固定肝糖元和尿酸；⑤长时间固定影响染色效果；⑥废液需特殊处理，不能直接排人管道。而其******的危害是对人体的侵害。2004年，WHO宣布其为致癌物，提醒人们重视甲醛的致癌性，采取预防措施。
3.2 制片过程
常规石蜡制片过程中，组织固定后需要脱水、透明、浸蜡处理，以及石蜡切片都必须经脱蜡处理后才能进行染色。二甲苯，一直作为透明、脱蜡的常规试剂，但二甲苯属于中度毒性的化学试剂，会对长期在二甲苯环境下工作的人员的身体造成损害，导致头晕、******、*********低下，是致癌物质之一。
3.3 GS环保套液与传统方法的区别
GS环保套液是无醛、无苯，******、无异味，与传 统方法相比主要特点：①固定液组织渗透力强，pH中性，能缩短脱水时间；②能保持良好的组织形态学结构，保护组织中的抗原和核酸不被破坏；③脱水效果好，不会产生组织脱水过度或不够的现象，大小组织可同时进行处理，尤其对脂肪、皮肤、子宫 肌瘤等组织处理优于传统制片方法；④GS透明液对组织处理温和，不易使组织变硬变脆；⑤GS脱蜡液可使组织脱蜡彻底，速度快；⑥染色步骤简化，节省时间；⑦所有废液回收方便，不需特殊处理。
3. 4使用GS套液与传统方法制片在HE染色、免疫组化染色方面相比，GS套液更加环保均能达到满意效果，符合临床病理诊断要求，且从根本上根除了甲醛和二甲苯对人类和环境的危害，符合实验室环保要求，值得在病理技术工作中广泛应用。
参考文献
[1] 蒋学之，张瑞稳，王耕兰.甲醛接触人员肿瘤死亡流行病学[J].中华劳动卫生职业病杂志，1990，8：261 -264.
[2] 周会芹，杨江辉，余琦，等.不同组织固定液对免疫组化结果的影响[J ].诊断病理学杂志， 2009，6(16):478.
[3] 高蓉梅，彭凤翔，李永春.TO型生物制片透明剂取代二甲苯在病理制片中的应用[J].诊断病理学杂志，2009，12(2):147.
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