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病理论坛在线咨询无醛、无苯、无汞—GS环保型病理制片套液的应用体会
无醛、无苯、无汞—GS环保型病理制片套液的应用体会
吴克非
哈尔滨医科大学附属第二医院病理科
目前，国内外一直普遍应用的甲醛固定、梯度乙醇脱水、二甲苯透明和脱蜡的传统病理制片技术已诞生的150多年，虽能达到临床诊断目的，但这种方法在制片过程中大量使用甲醛、二甲苯、氧化汞等有毒有害化学试剂。而甲醛、二甲苯对人体造血系统、神经系统等有较强的损害作用，有致癌性，是引发病理专业人员职业性苯中毒的主要试剂。使用后废弃的试剂，又对环境造成严重危害，替代甲醛、二甲苯试剂是病理操作人员多年以来的梦想。
针对上述情况，哈尔滨格林标本技术开发有限公司的多位病理专家经过多年的研究探索，终于开发出了******首创的全新病理技术平台—GS无醛、无苯、无汞环保型组织标本制备及切片染色技术。我院自2010年初使用至今，已应用10000余例人体组织样本制片，现将使用体会总结如下：
1. 材料和方法
1.1 材料
手术室送检的脂肪、淋巴结、乳腺、皮肤、肝脏等人体组织。
1.2 方法
组织样本取材体积在1.5×1.5×0.3cm3范围内，肌肉组织面积适中、厚薄均匀；淋巴组织剖开后再固定；骨组织须先固定再脱钙。而后采用GS 无醛、无苯标本制备套液在全自动全封闭脱水机进行组织处理，同时利用GS无苯工作槽清洗液对脱水机工作槽进行清洗；再经过GS无苯、无汞切片染色套液进行切片染色，***后采用GS无苯封片胶进行封片。
1、无醛组织固定液
2、组织脱水液Ⅰ
3、组织脱水液Ⅱ
4、无苯组织透明液
5、组织浸蜡液Ⅰ
6、组织浸蜡液Ⅱ
全自动全封闭组织脱水机操作程序
|
工作缸 |
试剂名称 |
工作时间 |
合计时间 |
|
1号 |
无醛组织固定液 |
1小时 |
4小时 |
|
2号 |
无醛组织固定液 |
3小时 |
|
|
3号 |
75%乙醇 |
5分钟 |
10分钟 |
|
4号 |
75%乙醇 |
5分钟 |
|
|
5号 |
组织脱水液I |
30分钟 |
1.5小时 |
|
6号 |
组织脱水液I |
1小时 |
|
|
7号 |
组织脱水液II |
30分钟 |
1.5小时 |
|
8号 |
组织脱水液II |
1小时 |
|
|
9号 |
无苯组织透明液 |
1小时 |
3小时 |
|
10号 |
无苯组织透明液 |
2小时 |
|
|
蜡缸1号 |
组织浸蜡液I |
3小时 |
3小时 |
|
蜡缸2号 |
组织浸蜡液II |
2小时 |
3小时 |
|
蜡缸3号 |
组织浸蜡液II |
1小时 |
|
|
11号 |
无苯工作槽清洗液I |
自动标准清洗程序 |
|
|
12号 |
无苯工作槽清洗液II |
自动标准清洗程序 |
|
|
13号 |
无水乙醇或纯净水 |
自动标准清洗程序 |
|
|
14号 |
废液收集 |
|
|
1、无苯切片脱蜡液I 
2、无苯切片脱蜡液Ⅱ
3、无汞苏木素染色液
4、伊红染色液
5、除浮染液
6、除水透明液
7、切片透明液
常规石蜡组织切片HE染色程序
|
序号 |
1 |
→ |
2 |
→ |
→ |
3 |
→ |
|
步骤 |
脱蜡液Ⅰ |
脱蜡液Ⅰ |
脱蜡液Ⅱ |
95%乙醇 |
自来水 缓流清洗 |
苏木素 染色液 |
自来水 缓流清洗 |
|
用时 |
5～10min |
5～10min |
2～3min |
10～20s |
2min |
3～5min |
10s |
|
序号 |
|
→ |
|
→ |
4 |
→ |
|
步骤 |
分化液 |
自来水 缓流清洗 |
蓝花液 |
自来水 缓流清洗 |
伊红 染色液 |
自来水 缓流清洗 |
|
用时 |
2～3min |
1～2s |
5～10s |
1～2min |
30～60s |
1～2s |
|
序号 |
5 |
→ |
→ |
6 |
→ |
7 |
→ |
|
步骤 |
除浮 染液 |
无水乙醇 |
沥干 |
除水 透明液 |
沥干 |
透明液 |
潮干 封片 |
|
用时 |
3s |
1min |
|
1min |
|
2min |
|
2. 结果
使用GS环保型病理制片套液，结果符合临床病理诊断要求。制片步骤由传统的三十几个步骤缩短至十三个步骤，并且效果稳定。处理后的组织固定好、脱水彻底、蜡块软硬适中；组织切片核浆对比清晰；同时对于硬组织（如子宫组织、皮肤组织等）能够大幅度节约切片机刀片。
GS环保型病理制片套液适用于常规组织样本制备及切片染色、术中冷冻切片染色、脱落细胞染色、免疫组织化学染色以及分子生物学（图1，2，3，4）。
HE×10 HE×4
3. 讨论
随着国家对节能减排的要求越来越高，甲醛、二甲苯等有毒害产品被强制性回收，ＧＳ无醛、无苯、无汞――环保型病理试剂每年可减少近千万吨的甲醛、二甲苯等有毒害气体排放，所产生间接的经济效益和社会效益无法估量。
哈尔滨格林标本技术开发有限公司自主研发的ＧＳ环保型病理制片套液效果符合制片要求，不影响病理诊断，完全可以替代百年来使用的传统甲醛、二甲苯制片方法。在保证制片质量的同时，确保了病理工作者的健康，有利于环境保护。希望格林公司能继续研发出病理相关的其他环保产品，也希望广大同行能共同参与到此项利国利民利已的工作当中。
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