GS-新型环保病理组织标本处理试剂应用报告
GS-新型环保病理组织标本处理试剂应用报告
连国亮 石凤茹 肖磊
首都医科大学附属北京安贞医院病理科
常规石蜡包埋切片,苏木素-伊红染色(HE)是当前医院病理科进行病理诊断的常规方法,是保证病理诊断准确***重要的环节。只有做出优质石蜡切片,才能准确做出组织化学、免疫组织化学染色,有助于提高病理诊断和鉴别诊断的准确率。但传统石蜡切片制作过程中大量使用甲醛、二甲苯等有毒有害试剂,对操作人员产生巨大伤害,成为了病理工作中无形的杀手,同时产生的废弃物,又会对环境造成更严重的二次污染,甲醛、二甲苯更成为了人们对病理科望而却步的魔鬼。并且传统组织处理过程纷繁复杂,尤其二甲苯对组织处理时间准确度要求较高,试剂量消耗较大,耗费了更多的人力、物力和财力。而新型格林组织固定脱水系列套装试剂和HE染色系列套装试剂为无苯无害试剂,2009年8月始我们对格林公司的上述试剂进行了试用,现将试用结果介绍如下。
一、试用计划
1.材料
选取我院病理科09年8月至11月各种病理组织标本200例,包括脂肪,子宫,胎盘,皮肤,小肠等组织。
2.仪器设备
选用樱花全自动密闭脱水机,樱花组织自动包埋机,徕卡封片机。
3.操作方法
使用格林公司无苯试剂,按照其推荐的方法进行组织处理(包括固定、脱水、透明、浸蜡、包埋,HE染色以及树胶封固全套试剂)
二、结果对比
(一)组织处理程序对比
序号 |
传统组织处理程序 |
格林系列套装试剂处理程序 |
备注 |
||
溶液种类 |
时间 |
溶液种类 |
时间 |
||
1 |
10%中性甲醛液 |
60分钟 |
固定液 |
210分钟 |
|
2 |
80%酒精溶液脱水 |
60分钟 |
脱水液 |
90分钟 |
|
3 |
95%酒精溶液I脱水 |
60分钟 |
脱水液 |
90分钟 |
|
4 |
95%酒精溶液I脱水 |
60分钟 |
透明液 |
90分钟 |
|
5 |
95%酒精溶液II脱水 |
60分钟 |
|
0分钟 |
|
6 |
纯酒精溶液I脱水 |
60分钟 |
|
0分钟 |
|
7 |
纯酒精溶液II脱水 |
60分钟 |
|
0分钟 |
|
8 |
纯酒精溶液III脱水 |
60分钟 |
|
0分钟 |
|
9 |
二甲苯溶液I透明 |
60分钟 |
|
0分钟 |
|
10 |
二甲苯溶液II透明 |
30分钟 |
|
0分钟 |
|
I |
48~50℃石蜡浸蜡 |
60分钟 |
浸蜡液 |
150分钟 |
|
II |
50~56℃石蜡浸蜡 |
60分钟 |
浸蜡液 |
150分钟 |
|
III |
58~60℃石蜡浸蜡 |
60分钟 |
|
0分钟 |
|
IV |
58~60℃石蜡浸蜡 |
60分钟 |
|
0分钟 |
|
|
|
810分钟 |
|
780分钟 |
|
(二)染色程序对比
序号 |
传统染色程序 |
格林系列套装试剂组织染色程序 |
备注 |
||
|
程序 |
时间 |
程序 |
时间 |
|
1 |
脱蜡:1-4缸 |
10*4分钟 |
1.脱蜡 |
15分钟 |
|
2 |
无水酒精 |
3分钟 |
2.脱蜡 |
5分钟 |
|
3 |
95%酒精 |
3分钟 |
3.水洗 |
|
|
4 |
80%酒精 |
3分钟 |
4.苏木素 |
1-3分钟 |
|
5 |
苏木素 |
5-10分钟 |
5.水洗 |
数秒 |
|
6 |
自来水水洗 |
1分钟 |
6.分化液 |
3秒 |
|
7 |
自来水返蓝 |
5分钟 |
7.水洗反蓝 |
|
|
8 |
伊红 |
1分钟 |
8.伊红 |
1分钟 |
|
9 |
80%酒精脱水 |
2分钟 |
9.水洗 |
数秒 |
|
10 |
95%酒精 |
5分钟 |
10.除浮液 |
3秒 |
|
11 |
无水酒精 |
5分钟 |
11.沥干 |
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|
12 |
无水酒精 |
5分钟 |
12.脱水透明液 |
2分钟 |
|
13 |
丙酮 |
5分钟 |
13.沥干 |
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|
14 |
丙酮 |
5分钟 |
14.透明液 |
1分钟 |
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15 |
二甲苯 |
10分钟 |
15.潮干 |
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16 |
二甲苯 |
10分钟 |
16.无苯胶水封片 |
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17 |
二甲苯 |
10分钟 |
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1)HE染色系列套装试剂化学成分与组织脱水套装试剂基本相同。
2)苏木素,伊红,染色所用时间短,着色能力强,核质清晰。
3)脱蜡剂在室温下2×5分钟对组织脱蜡,******缸脱蜡,第二缸脱蜡基本无味。
4)苏木素常规染色大于1分钟,对低浓度分化液非常敏感,分化时间严格制。
5)水洗返蓝1钟即可,同时反复摆动,提倡节约水资源。
6)伊红常规染色大于1分钟,但数秒也可着色。