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病理论坛在线咨询格林环保试剂在特殊染色中的应用体会
格林环保试剂在特殊染色中的应用体会
庞霞 赵华莹 尹玉慧 宋一民 黄培 张杨蕊 高冬玲
郑州大学******附属医院病理科 河南省肿瘤病理重点实验室
摘自：2013年03期《诊断病理学杂志》
摘要 目的：格林新型环保试剂在特殊染色中的应用体会。
方法：使用格林新型环保染色试剂和传统病理染色试剂在十几种特殊染色中使用及比较。
结果：新型环保GS病理切片染色套液染色效果稳定可靠。
结论：在特殊染色中传统病理染色试剂完全可以用格林新型环保染色试剂所替代。
关键词：环保试剂；特殊染色；体会
目前，随着分子生物学技术的发展和应用，逐步代替了许多特殊染色技术，但是由于特殊染色具有简单、快速和成本低的特点而一直被应用，而且许多特殊染色方法在原来生物基础上不断改良和创新，从而不能用其它方法所替代。但是，ATP酶近年来随着人们对环保意识的提高，实验室环保问题已备受关注。我们使用了格林新型环保试剂替代传统病理试剂，现将应用体会和各位老师们讨论交流。
1. 材料与方法
1.1材料
来自郑州大学******附属医院病理科标本。
1.2试剂
（1）GS病理切片染色套液：脱蜡液、苏木素、分化液、伊红、除水透明液和透明液；（2）传统病理染色试剂：二甲苯、梯度酒精、苏木素、1%盐酸酒精和伊红；（3）特殊染色的试剂：糖原染色、结核菌染色、六胺银染色、网状纤维染色、刚果红染色、Masson三色染色、黏液卡红染色、AB-PAS染色、乙酰胆碱酯酶染色、改良Gomori染色、ATP酶染色、NADH染色、SDH染色、NSE染色、油红O染色。
1.3方法
1.3.1 传统特殊染色方法
（1）常规石蜡切片；（2）切片经二甲苯Ⅰ、Ⅱ脱蜡各5分钟；（3）从高到低的梯度乙醇处理，自来水冲洗；（4）按照特殊染色的操作步骤进行染色；（5）从低到高的梯度乙醇脱水；（6）经二甲苯Ⅰ、Ⅱ透明各5分钟；（7）中性树胶封固。
1.3.2 GS病理切片染色方法
（1）常规石蜡切片；（2）切片经脱蜡Ⅰ、Ⅱ各两套均处理5分钟；（3）100%乙醇Ⅰ、Ⅱ各3分钟；（4）95%乙醇3分钟，自来水冲洗；（5）按照特殊染色的操作步骤进行染色；（6）95%乙醇、100%乙醇Ⅰ、Ⅱ进行脱水；（7）除水透明液两套各3分钟；（8）透明液两套各5分钟；（9）中性树胶封固。
2. 结果
GS病理切片染色试剂在十几种特殊染色中的染色质量和传统病理染色试剂相当，完全可以用GS病理切片染色试剂替代，减少了有害试剂对空气和人体的毒害，开创了一个无害环保的新环境。
3. 讨论
特殊染色技术目前已经成为临床病理诊断和鉴别诊断不可缺少的重要工具。一张成功的特殊染色切片有助于病理医******出准确的病理报告。但传统染色方法中使用的二甲苯等试剂对人和环境都十分有害。二甲苯作为***常用的苯类试剂大量应用病理组织处理和染色过程中，其毒害作用已经十分肯定，主要是吸入或经皮肤吸收，短期内吸入高浓度二甲苯可出现上呼吸道明显的刺激症状、眼结膜及咽充血、头晕、恶心、呕吐、胸闷、四肢无力、意识模糊，长期接触与癌症有密切的关系[1-2]。如果苯类试剂不经专业处理直接排入下水道，会造成周边环境的严重污染，若进行专业回收处理会大大提高成本。
随着******各国对环保意识的提高，实验室环保问题已备受关注。很多学者[3-5]尝试用脱色汽油、硬脂酸、异丙醇及松节油等替代二甲苯，虽然取得了一定的效果，但也存在许多弊端。本实验室使用了哈尔滨格林标本技术开发有限公司研发的新型环保GS病理切片染色套液，与传统试剂相比优势如下：（1）新型环保试剂可以自动降解，替代了传统有害试剂对人类和环境的污染，创建了一个绿色环保病理实验室；（2）病理切片脱蜡、脱水效果很稳定，未出现脱蜡不足的现象；（3）GS苏木素染液不含氧化汞，不产生氧化膜，染色效果色彩鲜明，并且不需自行配置，便于实验室质量控制；（4）透明剂渗透彻底，作用温和，保证了染色质量。
总之，新型环保GS病理切片染色套液具有创新性和实用性，染色效果稳定可靠，可以替代传统有毒病理试剂，并且有利人体的健康，减少环境污染，值得病理实验室广泛推广。
参考文献
1. 高蓉梅，彭凤翔，李永春，等.TO型生物制片透明剂取代二甲苯在病理制片中的应用[J].诊断病理学杂志，2009，12(2):147.
2. Acton A,Harvey T,Grow M W.An examination of non – fomalinbased fixation methods for xenopus embryos [J].Dev Dyn,2005,233(147): 1464–1469.
3. 周导，顾萍，严军守，等.硬脂酸石蜡混合液替代二甲苯透明剂制片的探讨[J].诊断病理学杂志，2006，13(1):75.
4. 张穗，程云芳，张颜春，等.脱色汽油替代二甲苯在组织浸蜡前的应用[J].人民军医，1997，40(12):736-737.
5.龙建洲.异丙醇替代二甲苯在组织透明中的应用[J].检验医学与临床，2010，7(2):161-162.下载地址：/uploadfile/file/20170811/20170811162111_91403.doc